張寧，蔣劍春*，楊靜，衛(wèi)民，趙劍，童婭娟

（中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所； 生物質(zhì)化學(xué)利用國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室； 國(guó)家林業(yè)局 林產(chǎn)化學(xué)工程重點(diǎn)開放性實(shí)驗(yàn)室； 江蘇省 生物質(zhì)能源與材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210042）

　　摘 要：應(yīng)用低能氮離子（N+）注入技術(shù)對(duì)纖維素酶產(chǎn)生菌里氏木霉（Trichoderma reesei）進(jìn)行誘變選育，在能量為 10 keV，注量為150×1014和200×1014 N+/cm2的條件下分別篩選得到3株纖維素酶高產(chǎn)菌株，連續(xù)5代遺傳穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，所得到的高產(chǎn)菌株遺傳穩(wěn)定性較好，羧甲基纖維素酶活力均提高到3.300 IU/mL 以上，較出發(fā)菌株 （2.698 IU/mL） 提高了20.0%以上。采用Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)法和旋轉(zhuǎn)中心組合設(shè)計(jì)法系統(tǒng)地研究高產(chǎn)菌株 150-1-1 發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)因子組成，得到了纖維素酶產(chǎn)量隨葡萄糖、麩皮和微晶纖維素等營(yíng)養(yǎng)因子的變化規(guī)律及相應(yīng)的響應(yīng)面分析圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，葡萄糖、麩皮和微晶纖維素濃度與纖維素酶活存在顯著的相關(guān)性，當(dāng)葡萄糖濃度為4.9 g/L，麩皮濃度為23.0 g/L，微晶纖維素濃度為7.7 g/L時(shí)，150-1-1纖維素酶濾紙酶活力達(dá)到2.439 IU/mL，較優(yōu)化前 （2.000 IU/mL） 提高了22.0%。

　　關(guān)鍵詞：N+離子注入；里氏木霉；纖維素酶

　　中圖分類號(hào)：TQ352;Q815 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1673-5854（2014）04-0028-07